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小鼠視網膜神經節(jié)細胞

簡要描述:尚恩生物依托國際化的*技術及多年專業(yè)化的原代細胞分離培養(yǎng)經驗,能夠為您提供高品質的原代細胞、原代細胞提取物定制服務。集結豐富經驗的人才,并配備了整套實驗設備,全程自主研發(fā),嚴控開發(fā)流程,保障產品質量,緊抓售后服務,可以提供高質量的小鼠視網膜神經節(jié)細胞。已與國內外多家科研單位、藥企、以及醫(yī)院等建立了良好的合作關系,成為生物醫(yī)藥行業(yè)的誠信伙伴和堅強后盾。

  • 產品型號:SNP-M182
  • 廠商性質:生產廠家
  • 更新時間:2023-04-19
  • 訪  問  量:647
詳細介紹
品牌其他品牌貨號SNP-M182
規(guī)格T25瓶供貨周期現貨
主要用途實驗應用領域生物產業(yè)

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一、細胞基本屬性

貨號:SNP-M182

產品名稱:小鼠視網膜神經節(jié)細胞

物種:小鼠

組織來源:視網膜組織

細胞簡介:該細胞分離自視網膜組織;視網膜居于眼球壁的內層,是一層透明的薄膜。視網膜由色素上皮層和視網膜感覺層組成,兩層間在病理情況下可分開,稱為視網膜脫離。色素上皮層與脈絡膜緊密相連,由色素上皮細胞組成,它們具有支持和營養(yǎng)光感受器細胞、遮光、散熱以及再生和修復等作用。組織學上視網膜分為10層,由外向內分別為:色素上皮層、視錐、視桿細胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內顆粒層、內叢狀層、神經節(jié)細胞層、神經纖維層、內界膜。視網膜內層為襯于血管膜內面的一層薄膜,有感光作用;后部鼻側有一視神經乳頭。視網膜上的感覺層是由三個神經元組成。第一神經元是視細胞層,專司感光,它包括錐細胞和桿細胞。視桿細胞主要在離中心凹較遠的視網膜上,而視錐細胞則在中心凹處最多。第二層叫雙節(jié)細胞,約有10到數百個視細胞通過雙節(jié)細胞與一個神經節(jié)細胞相聯(lián)系,負責聯(lián)絡作用。第三層叫節(jié)細胞層,專管傳導。視網膜是一層菲薄的但又非常復雜的結構,它貼于眼球的后壁部,傳遞來自視網膜感受器沖動的神經纖維跨越視網膜表面,經由視神經到達出口。視網膜的分辨力是不均勻的,在黃斑區(qū),其分辨能力*。視網膜神經節(jié)細胞貼壁后呈單層排列,部分細胞聚集成團,細胞呈圓形或橢圓形,核圓且相對透明,有些細胞膜上伸出短而小的突起;該細胞為高度分化細胞,在體外屬于不增殖群。視網膜神經節(jié)細胞是青光眼病理性損害的主要細胞,視網膜神經節(jié)細胞的死亡可導致視功能不可逆損傷,研究視網膜神經節(jié)細胞損害的細胞學和分子生物學機制有利于青光眼發(fā)病機制的研究。

方法簡介:采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法,結合視網膜神經節(jié)細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)和化學試劑抑制法篩選制備而來,細胞總量約為5×10^5cells/瓶。

配套體系:神經元體系

發(fā)貨形式:T25瓶(1×106左右)

規(guī)格:5×10^5cells/T25瓶

培養(yǎng)條件:具體培養(yǎng)條件詳詢尚恩生物細胞培養(yǎng)技術專員

培養(yǎng)環(huán)境:37℃,5%二氧化碳

我們推薦使用尚恩生物小鼠視網膜神經節(jié)細胞專用*培養(yǎng)基(產品貨號:SNPM-M182)作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。


二、細胞培養(yǎng)操作

換液周期2-3天
培養(yǎng)基體積T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
傳代比例1:2-1:4(具體情況視細胞生長速度及密度決定)
傳代方法1.盡量吸干凈T25瓶原培養(yǎng)基;
2.加3-4ml 常溫PBS輕輕潤洗細胞10-20s,吸走潤洗的PBS;
3.T25瓶加1ml左右胰酶,輕輕晃動培養(yǎng)瓶以使胰酶鋪勻瓶底細胞層;
4.將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化;
5.消化到細胞間隙變大,但未*脫落時加2-3ml*培養(yǎng)基終止胰酶消化;
6.混勻細胞,900rpm離心3-5min,棄上清;
7.加新的*培養(yǎng)基輕輕重懸細胞,均勻分到新的培養(yǎng)瓶里;
8.補足*培養(yǎng)基,將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng);
注意事項不同品牌胰酶消化時間差別較大,注意嚴格控制消化時間

消化傳代細胞時吹打細胞注意盡量輕柔,不要產生過多氣泡以免影響細胞狀態(tài)。


三、細胞凍存操作
凍存液配方92%FBS+8%DMSO(新手推薦)或92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(高手推薦);
凍存規(guī)格200-300萬/ml,1ml每管
凍存方法1.消化并離心獲得細胞沉淀后,加配置好的凍存液輕輕重懸細胞;
2.將細胞懸液盡快移入已經做好標記的凍存管;
3.將凍存管轉入程序凍存盒,放入-80度冰箱過夜,第二天轉入液氮保存;沒有程序凍存盒的實驗室,加入細胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min,再-20度靜置2h后轉入-80度過夜,第二天轉入液氮保存

注意事項凍存細胞轉入液氮后及時復蘇一管檢查細胞凍存活性,若有異常,及時調整實驗方案


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